Питер Паркер — обычный подросток, которого воспитывают дядя Бен и тётя Мэй после таинственного исчезновения родителей. В школе он терпит насмешки хулиганов, но находит отдушину в своих чувствах к однокласснице Гвен Стэйси, которая, сама того не показывая, тоже неравнодушна к умному и доброму Питеру. Всё меняет один укус — генетически модифицированный паук наделяет юношу невероятной силой, ловкостью и «паучьим чутьём», превращая застенчивого паренька в обладателя фантастических способностей.
Теперь Питер пытается разгадать загадку прошлого своей семьи. Он выходит на Курта Коннорса, бывшего коллегу своего отца, работавшего с ним над революционной формулой регенерации. Помогая Коннорсу завершить исследования, Питер невольно становится соучастником трагедии: отчаявшийся вернуть утраченную руку, учёный испытывает сыворотку на себе. Превратившись в чудовищного Ящера, Коннорс начинает терроризировать город. Осознав, что его действия привели к катастрофе, Питер принимает ответственность на себя. Под маской Человека-паука он выходит на тёмные улицы Нью-Йорка, чтобы остановить монстра, которого помог создать, и защитить тех, кого любит.